AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIOXIDANTE - TESTE DA DEGRADAÇÃO OXIDATIVA DA DESOXIRRIBOSE

Princípio do teste:

O teste se baseia na reação do ácido tiobarbitúrico (TBA) com produtos da degradação oxidativa da desoxirribose formando adutos coloridos, os quais são detectados espectrofotometricamente (Halliwell & Gutteridge, 1981). Utiliza-se no ensaio um sistema gerador de espécies reativas de oxigênio (ERO), que induzem a ruptura do anel da desoxirribose, formando aldeídos reativos com o TBA. Neste ensaio, utilizamos um sistema pró-oxidante constituído por peróxido de hidrogênio e um complexo de ferro(III) e nitrilotriacetato (NTA), conhecidamente capaz de induzir danos oxidativos típicos em sistemas biológicos (Ogino e Okada, 1995). O teste da degradação oxidativa da desoxirribose tem sido amplamente utilizado para detectar tanto a formação de radicais hidroxila (Gutteridge e Halliwell, 1988), como sequestradores destes radicais (Laughton e col., 1989; Tadolini e Cabrini, 1988).

Referências Bibliográficas:

- Cotton, M.l. & Dunford, H.B. (1973). “Studies on horseradish peroxidase XI. On the nature of compounds I and II as determined from the kinetics of the oxidation of ferrocyanide”, Can. J. Chem. 51: 582-587.
- Gutteridge, J.M.C & Halliwell, B. (1988). “The deoxyribose assay: an assay both for “free”hydroxyl radical and site-specific hydroxyl radical production”, Biochem J. 253: 932-933.
- Halliwell, B. & Gutteridge, J.M.C. (1981). “Formation of thiobarbituric-acid-reactive substance from deoxyribose in the presence of iron salts”, FEBS Letters 128: 347-352.
- Laughton, M.J.; et.al. (1989). “Antioxidant and pro-oxidant actions of the plant phenolics quercitin, gossipol and myricetin”, Biochem. Pharmacol. 38: 2859-2865.
- Ogino, T. & Okada, S. (1995). “Oxidative damage of bovine serum albumin and other enzyme proteins by iron-chelate complexes”, Bioch. Biophys. Acta 1245: 359-365.
- Tadolini, B. & Cabrini, L.(1988). “On the mechanism of OH· scavenger action”, Biochem J. 253: 931-932.

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